[技术前沿]如何进行有机酸的方法优化
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时间：2017-07-25 14:47
最近跑液相遇到了问题，跑有机酸峰挨的太近，不好分开！
七月买的zorbaxsb_aq的柱子，条件都试过，用了乙腈和pH2.0的缓冲液，效果不佳。
现在是甲醇加pH2.3的能分开九种酸里的六种，
现在是抗坏血酸和乳酸分开了一点，但估计不能做积分处理，
昨天试过1.8的，结果两个峰之间的乳酸被盖住了，三个峰变成两个了。
5min-6min的三个峰分别是抗坏血酸，乳酸，莽草酸。
想请教，不想换柱子，还能有什么方法能让抗坏血酸和乳酸完全分开？
如果一定要用C18柱分析有机酸，第一件事情是要抑制有机酸的电离。
有机酸的pKa值在3.5-4.5左右，因此缓冲盐需要设在pH2附近。
一般C18柱的pH耐受范围是2-8，所以这里你选了耐酸的Zorbax SB_aq的柱子，pH耐受范围1-8，是对的。
但是仍然有三个靠前出峰的化合物不能分离，是什么原因呢？
我们来看一下这三个化合物的结构。
首先这三个化合物能和C18固定相作用的基团都非常少，
只有一两个甲基或亚甲基，也就是保留会很弱。
虽然实际上结构差异很大，但主要是极性基团，尤其是羟基的差别。
这种情况，其实非常适合用HILIC模式来分析。
使用水溶性的流动相，能够溶解样品。
和布满硅羟基的硅胶柱，能够保留样品。
没有一根色谱柱能分离所有的化合物。
虽然C18柱的使用非常普遍，但也不用执着于非它不可，
不然干嘛要发明那么多种柱子呢：）
