怎么判断色谱柱何时该换新柱了

标题：怎么判断色谱柱何时该换新柱了？

色谱工作者常会碰到这样的问题，什么时分该换色谱柱了? 色谱柱的塔板数能表现色谱柱的状况吗?确认标明一支色谱柱应该“退休”的规范，从经验来看，当一支色谱柱的塔板数降低到新柱子时的百分之多少时就能够以为该色谱柱不能再运用了呢?在您的实验室里是怎么判断一根色谱柱不能够再用了呢?

相信每个色谱工作者都会关心分辨率，分辨率是调查一根色谱柱别离详细样品的好坏程度的目标。色谱的中心任务便是为了使每个峰完结别离，咱们在实际工作中需要得到合理峰宽的窄峰以便获得较低的检测限(这现已不是什么难题，现在的色谱柱都能够达到这个要求)。　

较好的办法是运用压力、分辨率和峰形的混合目标来调查一根色谱柱的状况。压力的丈量是zui简单的，一般咱们确认的色谱办法要满足以下的要求：用新柱子时柱压不高于2500psi，在任何状况下压力都不超越3000psi。虽然现代的液相色谱体系都可在更高的压力下运用，但因为高压产生的体系损耗和泄漏的问题会很严峻。当压力超越3000psi时，考虑替换进样器和色谱柱之间的0.5mm孔径的在线滤片。假如替换滤片后压力依然高，则色谱柱的滤片或者是色谱柱现已被污染，这提示咱们该换柱子了。有计算标明，超越60%的色谱柱损坏是因为压力过高的原因。

分辨率是咱们调查色谱柱的一个非常重要的目标，只需两个组分能够获得基线别离，对该剖析物的定量就不会有什么问题。对于对称的高斯峰来讲，1.5的分辨率即可得到基线别离;若Rs在1.7至2.0之间则更好。若峰拖尾严峻则需要更高的分辨率。运用分辨率作为色谱柱的评价目标的优点在于咱们能够直观地看到相邻的峰的别离状况。

别的一个调查色谱柱质量的规范是峰形拖尾状况，厂家测试报告的峰形都非常美丽，但这并不代表该色谱柱剖析实际样品的状况。实际样品中总是含有或多或少引起峰形拖尾的组分。zui值得一提的是含有氮原子的化合物，这些化合物和硅胶骨架上的游离硅羟基结合非常严密，随着色谱柱运用时刻越长，键合相丢失，拖尾则更加严峻。然而拖尾状况的改动不像分辨率的改动那样能够马上看出来。基于此，zui好定一个拖尾因子的上限，如美国药典规则拖尾因子不超越1.8。

确认色谱柱“抛弃”规范的zui佳时刻是当咱们开发剖析办法或作办法认证的时分。一般，在开发剖析办法的过程中你会实验几根色谱柱，剖析足够多的实际样品，你知道当别离变差的时分是什么样的状况。我倾向于在开始时运用一个宽的范围。咱们的经验是这样的：你假如在开始时紧缩体系适用性要求，在办法认证后再放宽这个要求是很困难的。在剖析实际样品之前进行体系适用性调查，以保证该色谱办法满足剖析者能够承受的规范。

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