紫外分光光度计校准方法内容
大家知道，分光光度法的重要的一个物理化学量是吸光度。为了获得精确的研究成果，精确测得样品溶液的吸光度是非常重要的。一般，剖析成果的不可靠性与偶然差错和系统差错有关。偶然差错影响丈量的精密度，可经过足够数量丈量的核算处理来削减;系统差错影响丈量成果的精确度，可在大体相同实验条件下，用比较一种物质的精确丈量成果，使系统差错一致起来。而分光光度计的系统差错对丈量吸光度的影响是能够查看和校对的。关于操作差错，多数情况下，经过严格按操作程序丈量、仪器调零、精确称量等来控制或削减这种差错的发生。关于仪器的系统差错，可经过对分光光度计的定期校对来克服，若所需精确度很高的丈量，则有必要天天校对。
紫外分光光度计校准内容：
1.波长的精确度实验以仪器显示的波长数值与单色光的实际波长值之间差错表示，应在±1.0nm规模内。可用仪器中氘灯的486.02nm与656.10nm谱线进行校对。
2.吸收度的精确度实验
3.杂散光的实验
4.波长重现性实验
5.分辨率实验
吸光度的校对办法：
校对吸光度常用一很纯物质必定浓度的溶液为规范，且此溶液的吸光度系数经不同实验室核对，为了使规范液吸光度不受测定波长的微移动而有改动，常挑选具有较滑润吸收高峰的物质，一起要求溶液稳定，且在相当的波长规模内吸收度的改动符合Beer-Lambert规律，常用硫酸铜、硫酸铵钴和硝酸钠或钾的溶液。铬酸钾溶液是常用的规范溶液，此溶液在紫外区和可见区均适用。
波长或波数的校对办法：
可用具有窄吸收带的溶液，滤光片或蒸气来校对所需求的光波规模。假如要求很高的精密度时，可用放电灯泡发射的射线来校对。有的光谱仪其上已装有一个为校对用的灯。苯的蒸气对校对必定规模的波长亦很有用，可用一小滴苯放于一厘米厚的吸收杯中，测其吸收波长，在远紫外区可用氧气的吸收带进行校对。用各种稀土金属的滤光片，能够很快地校对波长，但精确度不如上述办法高。常用含有钬和钕、镨离子的滤光片。
杂散光的校对办法
小量的杂散光往往会引起较大的丈量差错，它的校对可用一个能完全吸收某一波长单色光，且在其他波长吸收很弱的溶液。从这个溶液所体现的透光情况可推测杂散光的近似值。由杂散光带来的伪吸收带，亦可用Beer-Lambert规律来查看，但用此规律查看伪吸收带差错较大。由切断规模之外所体现的透射比可得出近似的杂散光百分数。若所含杂散光大于0.1%，应设法减低，或对测得的吸收光度进行校对。由杂散光引起的差错与杂散辐射成正比，因而校对值很容易从化合物的近于正确的曲线核算而得。此外，还可用一个适当的滤光片，该滤光片在测定波长规模内完全透光，但吸收此规模外的光波，由此来消除杂散光。
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