高效液相色谱（2）-岛津LC—20AT型高效液相色谱仪操作规程
一、 流动相及样品的准备
1、流动相的选择，有机溶剂必须是色谱级，水必须是超纯水或二次蒸馏水。
2、流动相用0.45μm孔径的滤膜过滤（水和有机相所用的滤膜不同，有机相用
F膜，水相用水膜），超声脱气后置于储液瓶中。
3、根据待检测样品的需要更换合适的色谱柱。
4、样品溶液亦必须用0.45μm的微孔滤膜过滤后才能进样。
二、 开关机顺序
1、 开机顺序：先打开泵、自动进样器、柱温箱、检测器电源，再打开系统控制器的电源，点击电脑中的Lc-solution工作站联机，连上后能听到两次“嘀”的声音。
2、 关机顺序：与开机顺序相反，即先关闭Lc-solution工作站→系统控制器→泵、自动进样器、柱温箱、检测器。
3、 待设备自检结束后，打开仪器对输液泵及自动进样器进行必要的Purge操作，排出相应流路中的气泡，使新鲜溶剂在流路中得以置换；检查输液泵在动作前的压力显示值，必要时对此压力值进行调零 。
三、 LC-solution 操作界面的进入及系统的开启
1、 双击桌面上Lc-solution图标，选择屏幕左侧“操作”项并单击，在弹出的窗口中双击操作仪器所对应的图标，弹出窗口后输入用户名ID及密码，按“确定”进入仪器实时分析界面 。
2、 点击助手栏中的“仪器参数”进入仪器参数设置界面，设置采样时间，流动相流速及配比，检测波长，柱温等。在完成后点击“下载”将分析参数传输至主机。
3、 分析方法的保存：选择文件→另存方法文件为→选择保存路径→取名保存文件。该方法即作为当前运行的方法。
4、 打开仪器上的排空阀（逆时针方向旋转180°），点击仪器面板上“purge”
按钮开始清洗5个流路3分钟。
5、 系统的启动：点击“仪器开/关”键开启系统（此时泵开始工作）
四、 进样准备及单次进样分析
1、 将样品瓶放入自动进样器中
2、 观察基线及柱压，待基线平直（-5~30mv），压力稳定（0.5Mpa）时方可进样。
3、 点击助手栏中“单次分析” 键，出现采样对话框。 在对话框中输入“ 样品名称”，“样品信息”，“方法文件名”，“数据文件名”，“样品瓶号”，“样品架号”，“ 进样量”等样品参数。
4、 填完后点击“确定”键，仪器开始自动进样操作。
五、 批处理分析
1、点击批处理分析图标，点击助手栏中的“向导”。编辑方式为新建或添加，方法文件默认为当前方法，可根据需要选择相应方法。
2、根据提示逐步输入“开始样品编号”、“进样体积” →“样品组数” →标准样品“数据文件路径、名称”、“校正级别数”、“重复进样次数”未知样品的信息。填写后“完成”。
3、保存批处理文件：文件→批处理文件另存为→路径、名称→保存。
4、启动批处理：仪器处于“就绪”状态后点击助手栏中的开始批处理，开始运行。
六、 数据文件的查看及定量分析（外标法为例）
1、 点击助手栏中的“再解析”键，点击“PDA数据分析”打开数据处理窗口。
2、 打开文件收索器，定位至数据文件所在的文件夹，选择文件的类型，双击文件名即可打开数据文件（此时可以查看峰面积、保留时间等参数）。
3、 点击助手栏中的向导，逐步填写相关信息直至完成。
4、 另存方法文件为→对话框选择“是” →选择保存路径和名称→点击“确定”。
5、 关闭当前数据文件并保存。
6、 单击左侧助手栏中的“LC数据分析图标” →在数据浏览器中找到要计算的数据文件并“打开”
7、 文件→加载方法参数→选择以保存的方法文件，打开→对话框中选择“是”，计算完毕。
七、 数据文件中报告预览和打印
1、 报告模板的制作：点击 Top 返回上级引导操作栏，助手栏中点击“再解析”
—“PDA数据分析”—“数据报告” 进入报告界面。
2、 调入报告格式文件，用鼠标将报告格式文件拖拽到右侧报告栏内即可。
3、 报告格式的制定和修改，可以通过点击“样品信息”、“方法信息”、“LC/PDA色谱图”、“LC/PDA校正曲线”、“LC/PDA峰表” “LC/PDA结果”等内容图标，拖拽鼠标到报告中确定位置，即可依次加入相应的统计信息。
4、 报告模板保存：文件—另存报告格式文件—Lc-solution路径—文件名—保存。
5、 数据的打印：在文件收索器中选择欲打印的数据文件，拖拽至报告模板中，
然后点击助手栏中的打印按钮即可。
九、实验结束
1、实验结束，用甲醇冲洗泵30min（若实验时用酸或缓冲盐做流动相时，先用
纯水先冲洗泵60min,然后用甲醇冲洗泵30min）。
2、点击“仪器开/关”键，停泵，待泵的压力下降到0.5Mpa以下，按关机顺序
关闭仪器电源 。
3、清洗工具，打扫实验室，填写《大型精密仪器设备使用记录表》。
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