高效液相色谱仪贮液器介绍及影响梯度洗脱的因素
高效液相色谱仪贮液器概述：
高效液相色谱仪贮液器是用来存放流动相的容器，供给符合要求的流动相以完成液相色谱分析工作。
一、贮液器材质：
贮液器材质应耐腐蚀，对洗脱液呈化学惰性，可为玻璃、不锈钢和聚四氟乙烯等材料。
二、贮液器容积：
贮液器容积与色谱柱的粗细、输液泵的种类和所采用的液相色谱系统有关，一般容积约为0.5～2L，以便在不重复加液的情况下能连续工作。对凝胶色谱仪和制备液相色谱仪，其容积应更大一些。
三、贮液器放置位置：
贮液器放置位置要高于输液泵，以保持一定的输液静压差。
四、贮液器的密闭：
使用过程中贮液器应密闭，防止溶剂蒸发引起流动相组成的变化，防止空气中O2和CO2重新溶解在已脱气的流动相中。
五、溶剂的过滤：
高效液相色谱所用的溶剂在放入贮液器之前必须经过0.45um的滤膜过滤，除去溶剂中可能含有的机械性杂质，防止输液管道或进样阀产生阻塞。对输出流动相的连接管路，其插入贮液器的一端通常要连有孔径为0.45um的多孔不锈钢过滤器或由玻璃制成的专用膜过滤器。
影响高效液相色谱仪梯度洗脱的因素：
高效液相色谱仪进行梯度洗脱时，选定溶剂A、B之后，设定梯度速度和梯度时间，确定梯度曲线形状，要以zui经济的梯度洗脱程序，实现样品的zui佳化分离。影响梯度洗脱的因素有：
1、溶剂的纯度要高，否则会使梯度洗脱的重现性变坏。
2、梯度混合的溶剂互溶性要好，应防止不互溶的溶剂进入色谱柱。
3、注意溶剂的粘度和密度对混合流动相组成的影响。
4、梯度洗脱应使用对流动相组成变化不敏感的选择型检测器，而不能使用对流动相组成变化敏感的通用型检测器。
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