安捷伦液相色谱仪的标准操作
安捷伦液相色谱仪的标准操作
1. 目的:清晰安捷伦液相色谱仪的标准操作,确保数据的准确性。
2. 规模:适用于安捷伦液相色谱仪。
3. 职责:查验人员对此负责。
4. 操作规程:
4.1 体系组成
本体系由1个溶剂二元输送泵(分主/A泵和副/B泵)、手动进样阀、柱温箱、检测器、化学工作站和电脑等组成。
4.2 安捷伦液相色谱仪预备
4.2.1运用前应根据待检样品的查验办法预备所需的活动相,用适宜的0.45μm滤膜过滤,超声脱气20min。
4.2.2 根据待检样品的需要替换适宜的色谱柱(柱进出口位置应与活动相流向一致)和定量环。
4.2.3 制造样品和标准溶液(也可在平衡体系时制造),用适宜的0.45μm滤膜过滤。
4.2.4 检查仪器各部件的电源线、数据线和输液管道是否连接正常
4.1 将待测样品按要求前处理,预备HPLC 所需活动相,检查线路是否连接完好,废液瓶是否够用等。
4.3安捷伦液相色谱仪开机:
4.3.1 翻开计算机,进入中文Windows XP画面,并运转CAG Bootp Server程序。
4.3.2 翻开 1200 LC 各模块电源。
4.3.3 待各模块自检完成后,双击[Instrument 1 Online]图标,化学工作站主动与1200LC
通讯,进入的工作站画面如下所示。
4.3.4 从[视图]菜单中挑选[办法和运转操控]画面, 点击[视图]菜单中的[显现顶部 工具栏], [ 显现状况工具栏],[体系视图],[样品视图],使其指令前有[√]标志,来调用所需的界面。
4.3.5 把活动相放入溶剂瓶中。
4.3.6 翻开冲洗阀。
4.3.7 点击[泵]图标,点击[设置泵…]选项,进入泵修改画面。
4.3.8 设流速:5ml/min,点击[确认]。
4.3.9 点击[泵] 图标,点击[操控…]选项,选中[发动],点击[确认] ,则体系开端冲洗,直到管线内(由溶剂瓶到泵入口)无气泡停止,切换通道继续冲洗,直到一切要用通道无气泡停止。
4.3.10 点击[泵] 图标,点击[操控…]选项,选中[封闭],点击[确认]关泵, 封闭冲洗阀。
4.3.11 点击[泵]图标,点击 [设置泵…选项],设流速:1.0ml/min。
4.3.12 点击泵下面的瓶图标,如下图所示(以单元泵为例),输入溶剂的实际体积和瓶体积。 也可输入停泵的体积,点击[确认]。
4.4 安捷伦液相色谱仪的数据收集办法修改
4.4.1开端修改完好办法:从[办法]菜单中挑选[修改完好办法…] 项,如下图所示选中除[数据剖析 ]外的三项,点击[确认],进入下一画面。 4.4.2办法信息
4.4.2.1在[办法注释]中参加办法的信息(如:测验办法)。 4.4.2.2 点击 [确认], 进入下一画面。 4.4.3 泵参数设定
4.4.3.1 在[流速]处输入流量,如1ml/min,在[溶剂 B]处输入80.0,(A=100-B) ,也可[刺进 ]一行[时刻表] ,修改梯度。在[压力限]处输入柱子的zui大耐高压,以维护柱子。
4.4.3.2 点击[确认],进入下一画面。
4.4.4 柱温箱参数设定
4.4.4.1 在[温度]下面的空白方框内输入所需温度,如:40度。并选中它,点击[更多>>] 键,如图所示,选中[与左边相同],使柱温箱的温度左右一致。
4.4.4.2 点击[确认],进入下一画面。
4.4.5 检测器参数设定:检测波长:一般挑选zui大吸收处的波长。样品带宽:一般挑选zui大吸收值一半处的整个宽度。参比波长:一般挑选在接近样品信号的无吸收或低吸收区域 。参比带宽:至少要与样品信号的带宽相等,许多情况下用100nm作为缺省值。一起能够输入收集光谱办法,步长,规模,阈值。选中所用的灯。
4.4.6 在[ 运转时选项表 ]中选中[ 数据收集],点击[确认]。
4.4.7 点击[办法]菜单,选中[办法另存为…],输入一办法名,如[测验],点击[确认]。
4.4.8 从菜单 [视图]中选中[在线信号],选中[信号窗口1],然后点击[改动…] 钮,将所要绘图的信号移到右边的框中,点击[确认]。(如一起检测二个信号,则重复10,选中[信号窗口2]。
单击[改动]键,即可弹出右侧的[修改信号图谱]窗口,从而挑选所需的谱图信号。 4.4.9 从[运转操控]菜单中挑选[样品信息]选项,如下图所示,输入操作者称号,如[安装工程师];在[数据文件 ]中挑选[手动]或[前缀/计数器]。区别: 手动--每次做样之前有必要给出新姓名,不然仪器会将前次的数据覆盖掉。 Pr—在前缀/计数器----[前缀]框中输入前缀,在[计数器]框中输入计数器的起始位,仪器会主动命名,如vwd数据0001,vwd数据0002……。
4.4.10 点击[确认] ,从[仪器] 菜单挑选[体系开启]。
4.4.11 等仪器预备好,基线平稳,用试样溶液清洗注射器,并扫除气泡后抽取适量。
4.5 安捷伦液相色谱仪的数据剖析办法修改:
4.5.1 从[视图]菜单中,点击[数据剖析]进入数据剖析画面。
4.5.2 从[文件]菜单挑选[调用信号],选中您的数据文件名,如下图所示。点击[ 确认],则数据被调出。
4.5.3做谱图优化:从[图形]菜单中挑选[信号选项],如下图所示。从[规模] 中挑选[满量程] 或[主动量程] 及适宜的时刻规模或挑选[自定义量程] 调整。重复进行,直到图的比例适宜停止。点击[ 确认]。
4.6安捷伦液相色谱仪积分:
4.6.1 从[积分]菜单中挑选[积分事件]选项,如下图所示。挑选适宜的[斜率灵敏度]
,[峰宽],[zui小峰面积],[zui小峰高]。
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