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荧光酶标仪和光吸收酶标仪原理介绍

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时间:2019-10-08 15:03:02

酶标仪是构成酶免查验工作站的其间一种医疗器械,还有一个比较重要的设备是洗板机,酶标仪有荧光酶标仪和光吸收酶标仪之分,那么荧光酶标仪原理与光吸收酶标仪原理有什么区别呢?具体内容如下所示:


荧光酶标仪原理

由光源氙弧灯发出的光经过切光器使其变成断续之光以及激起光单色器变成单色光后,此光即为荧光物质的激起光,被测的荧光物质在激起光照耀下所发出的荧光,经过单色器变成单色荧光后照耀于测样品用的光电倍增管上,由其所发生的光电流经过放大器放大输至记载仪,激起光单色器和荧光单色器的光栅均由电动机带动的凸轮所控制,当测绘荧光发射光谱时,将激起光单色器的光栅,固定在zui恰当的激起光波利益,而让荧光单色器凸轮滚动,将各波长的荧光强度讯号输出至记载仪上,所记载的光谱即发射光谱。

当测绘荧光激起光谱时,将荧光单色器的光栅固定在zui恰当的荧光波利益,只让激起光单色口的凸轮滚动,将各波长的激起光的强度讯号输出至记载仪,所记载的光谱即激起。

当进行样品溶液的定量分析时,将激起光单色器固定在所挑选的激起光波利益,将荧光单色器调理至所挑选的荧光波利益,由记载仪得出的信号是样品溶液的荧光强度。


光吸收酶标仪原理

光是电磁波,波长100nm~400nm称为紫外光,400nm~780nm之间的光可被人眼观察到,大于780nm称为红外光。光吸收酶标仪测定的原理是在特定波长下,检测被测物吸光值。jjymafwh

光经过被检测物,前后的能量差异即是被检测物吸收掉的能量,特定波长下,同一种被检测物的浓度与被吸收的能量成定量联系。

检测单位用OD值表明,OD是opticaldelnsity(光密度)的缩写,表明被检测物吸收掉的光密度,OD=1og(1/trans),其间trans为检测物的透光值。依据Bouger-amberT-beer规律,OD值与光强度成下述联系:E=OD=logΙ0/Ι其间E表明被吸收的光密度,Ι0为在检测物之前的光强度,Ι为从被检测物出来的光强度。


OD值由下述公式核算:

E=OD=C×D×E

C为检测物的浓度

D为检测物的厚度

E为摩尔因子


在特定波长下测定每一种物质都有其特定的波长,在此波长下,此物质能够吸收zui多的光能量。如果挑选其它的波长段,就会形成检测成果的不准确。因此,在测定检测物时,我们挑选特定的波长进行检测,称为测量波长。


可是每一种物质对光能量还存在一定的非特异性吸收,为了消除这种非特异性吸收,我们再选取一个参照波长,以消除这个不准确性。在参照波长下,检测物光的吸收zui小。酶标仪检测波长和参照波长的吸光值之差能够消除非特异性吸收。




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