【行业新闻】新冠病毒是这样被P3实验室检测出来的
在广东省第二人民医院P3实验室标本处理间内，研讨人员正进行开盖加样和核酸提取。
核酸检测是确诊新冠肺炎的“金标准”，而检测流程中的每一个环节都是精细活，容不得半点粗心。
“这儿是与病毒‘零距离’接触的当地，整个实验室完全密封，室内处于负压状况，我们喜爱用‘三流’来描述它，即人流、物流、气流的单向活动，确保在里面的污染物不会泄露到外面而造成污染。”广东省第二人民医院P3实验室主任林剑国说。而他说的“这儿”指的就是P3实验室（生物安全防护三级实验室）。广东省第二人民医院每天400多份新冠病毒核酸检测就是在这儿展开的。
现在，让我们揭开广东省第二人民医院P3实验室的奥秘面纱，看看在这儿病毒究竟是怎样被“揪出来”的？
检测流程每个环节都是精细活
核酸检测是确诊新冠肺炎的“金标准”，而检测流程中的每一个环节都是精细活，容不得半点粗心。
实验室内的检测流程可分为5个过程：样本进入“传递窗”—灭活处理—开盖加样和核酸提取—扩增反应判别效果—高压灭菌。
第一步，搜集的检测样本如咽拭子或肛拭子，在进入P3实验室前就得先进入一个特别的窗口——“传递窗”，这个窗口也叫Air Lock，空气锁，望文生义，与空气有关。这个传递窗有不能一同翻开的两层门，确保传递样本时带进去的空气被阻隔在两层门中，确保实验室外的环境不受污染。这也是“三流”中“物流”，样本从这儿敞开了其在实验室中短暂的终身。
第二步，样本在水浴箱经半个小时56℃的高温灭活，使病毒蛋白不再有生理活性，失掉感染、致病和繁殖能力，使实验员在对样本进行检测时相对安全，但是病毒蛋白的基因序列并没有受到影响。
第三步，进行开盖加样和核酸提取。
第四步，提取的核酸送到核酸检测室内，就要上仪器了。提取的核酸参加扩增试剂中，经过荧光PCR仪进行RT-PCR反应，先将提取的核酸回转录成DNA，再以DNA为模版，对特定位点进行扩增，使用不同的温度进行变性、退火和延伸，每个循环搜集荧光值，45个循环后制作荧光曲线，用时约110分钟，实验员根据荧光曲线剖析判别效果的阴性和阳性。
第五步，实验进程发生的污物经过高压灭菌后，按相关普通医疗垃圾处理。“物流”在这儿就完毕了。
检测效果履历重重比对与复核
任何一个环节呈现问题都或许导致检测效果过失。因而，为确保检测的质量，检测效果将履历重重的比对与复核。
据介绍，检测质量的确保办法在检测前就现已开始了，样本搜集的医务人员有必要经过严峻的练习和考核才华上岗，样本的质量与搜集的技术密切相关，每个动作流程都有必要按规定进行，样本搜集完成后的护送作业也需依照紧密的程序，由专人专道配送到实验室。
在检测进程中，实验员始终保持慎重的情绪进行每一次检验，不失去任何一个可疑样本，针对可疑样本，还会选用不同的试剂进行复核确认；其次，依照流程，每进行一批实验，均会随机刺进三个以上空白对照，针对阳性样本还会进行病毒基因的测序比对，以避免“假阳性”的呈现。
检测后，实验室还会定时随机抽取检测样本送到第三方实验室进行检测，对数据进行比照剖析，一同实验室也会参加卫生主管部门和广东省临床中心的室间质评，确保检测的准确性。
病毒“侦察兵”业务过硬又勇敢
在操作中，实验员面临眼前的样本，需求“一个一个地揭开盖子，进行开盖加样和核酸提取”，这无疑是与病毒的正面交锋。核酸检测的主旨是高效、有序和安全。其中安全是重中之重，尤其是实验员的安全。
因而实验员要进入P3实验室，首要应在清洁区内穿戴中级防护服，经过缓冲间进入实验室负压作业间，在这儿进行标本处理，核酸提取及检测，完毕后进行空间、外表消毒，再按次序脱下防护服，经过淋浴间更衣后，回到清洁区。这些过程有必要严峻履行，一个都不能少。
广东省第二人民医院P3实验室检测团队现在有21人，施行一天三班制。在疫情爆发阶段，为了满意检测需求，缩短检测时间，实验室又在原有团队基础上，从风湿免疫科、血液科等科室的实验室调配了人员。这些病毒“侦察兵”70%以上是硕士以上学历，均经过分子生物学的练习，并具有多聚酶链反应（PCR）上岗证。
实验室严峻遵循“新式冠状病毒肺炎医治方案”及生物安全要求，检测人员需在P3实验室负压密闭的空间里穿戴三级防护配备，5个小时不吃不喝，甚至穿戴成人纸尿裤以处理上厕所的问题，随时需求面临因负压差及配备紧密导致的头晕、吐逆等症状。
“与战争在病房里的医护人员不同，他们藏在实验室里，每天与病毒近距离接触，是人们看不见的‘最前哨’。”林剑国说。
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生物安全防护实验室分几级
生物安全防护实验室是指实验室的结构和设施、安全操作规程、安全设备可以确保作业人员在处理含有致病微生物及其毒素时，不受实验目标侵染，并确保周围环境不受污染。
根据所处理微生物及其毒素的危害程度不同，生物安全防护实验室分为四级，一级最低，四级最高。生物安全防护一级实验室一般适用于对健康成年人无致病效果的微生物；二级适用于对人和环境有中等潜在危害的微生物；三级适用于首要经过呼吸途径使人传染上严峻的甚至是致死疾病的致病微生物或其毒素；四级适用于对人体具有高度的风险性，经过气溶胶途径传达或传达途径不明、尚无有效疫苗或医治办法的致病微生物或其毒素。
20世纪80时代，为了研讨流行性出血热病毒的传达机制，我国修建了第一个P3实验室。2003年爆发的SARS疫情，是我国高等级生物安全实验室展开的一个分水岭。SARS爆发后，我国发布了国家生物安全实验室制作系统规划。一批P3实验室投入工作，并建成了P4实验室。
2015年1月31日，我国首个P4实验室、中科院武汉国家生物安全实验室在武汉竣工。2018年1月4日，实验室经过国家卫计委（现国家卫健委）高致病性病原微生物实验活动现场评估，成为我国甚至亚洲首个正式投入工作的P4实验室。
其时，全球的P4实验室制作正呈现超速展开的趋势。这与全球化时代的烈性流行症风险有关，也与国家生物安全战略有关。据不完全统计，全球已知有22个国家和地区的60个组织具有P4实验室。但由于P4实验室相关内容触及国家生物安全中心机密，所以一些国家并未揭穿数据。
经过这些年的展开，现在我国已有几十家P3、P4实验室，为我国烈性与严重流行症防控、生物防备和产业展开作出了重要贡献。
来源：科技日报
